Kromasil 色譜柱的使用與維護(hù)

色譜柱安裝與平衡

使用經(jīng)過(guò)濾并脫氣的流動(dòng)相( 不含任何緩沖液) *沖洗HPLC 泵和管線，確保系統(tǒng)中沒(méi)有氣泡。按照流向標(biāo)簽( 位于色譜柱上) 指示的方向?qū)⑸V柱一端連接至進(jìn)樣器，另一端不接檢測(cè)器。將泵流速設(shè)置為0.1 mL/min( 或系統(tǒng)允許zui低設(shè)置) 并在5 分鐘內(nèi)增大至正常流速。

當(dāng)色譜柱出口處有溶劑自由流出時(shí)停止泵送，擦拭出口端并將其連接到檢測(cè)器。

以正常流速和約10-30 倍色譜柱體積的流動(dòng)相來(lái)平衡色譜柱。

檢測(cè)柱效

強(qiáng)烈建議用戶在收到Kromasil 原裝jin口色譜柱15 天內(nèi)進(jìn)行柱效檢測(cè)，并在整個(gè)使用周期內(nèi)，

進(jìn)行定期的柱效測(cè)試，以便隨時(shí)監(jiān)測(cè)色譜柱的壽命情況。

運(yùn)行參數(shù)

5 μm 及3.5 μm 色譜柱最大耐受壓力400 Bar，2.5 μm 及1.8 μm 色譜柱最大耐受壓力1000 bar。最高工作溫度不高于60 ℃。在使用Kromasil Classic 系列C18，C8，C4，Phenyl

色譜柱時(shí)，流動(dòng)相pH 控制在1.5-9.5 之間，這樣有利于延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。

流動(dòng)相的配置

僅使用HPLC 色譜純?nèi)軇?、水、最高純度的化學(xué)品和試劑。

使用前對(duì)所有流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾和脫氣。

確保溶劑可互溶。

色譜柱的保存

色譜柱使用完畢后，應(yīng)盡可能地沖洗掉殘留在色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)和沉積物。保存在適合的儲(chǔ)存溶劑中，儲(chǔ)存溶劑可以參考COA 中建議使用溶劑。儲(chǔ)存環(huán)境需保持溫度穩(wěn)定、避光，并注意檢查Peek堵頭，防止松動(dòng)導(dǎo)致柱內(nèi)溶劑流失。

色譜柱的清洗

柱壓升高，保留時(shí)間變化和柱效降低都是色譜柱被污染的表現(xiàn)。

多數(shù)情況下，通過(guò)正確的沖洗能夠解決上述問(wèn)題。我們需要謹(jǐn)記的是越早沖洗或再生越會(huì)更容易的解決上述問(wèn)題。

通常具有較強(qiáng)吸附的雜質(zhì)都集中在色譜柱進(jìn)口一端，zui簡(jiǎn)單的方法是對(duì)色譜柱進(jìn)行反沖。反沖的方法只對(duì)填裝緊密的色譜柱有效，柱性能也不會(huì)發(fā)生變化。

反沖時(shí)，請(qǐng)按照下述的一般步驟，使用特定溶劑對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗，并根據(jù)不同廠商的建議進(jìn)行，以免損壞色譜柱。

反沖時(shí)，請(qǐng)將流動(dòng)相流速將至正常流速的1/10-1/5, 并斷開(kāi)檢測(cè)器。反沖時(shí)，請(qǐng)將流動(dòng)相流速將至正常流速的1/10-1/5, 并斷開(kāi)檢測(cè)器。

Kromasil 保護(hù)柱

色譜柱一旦污染，沖洗過(guò)程將非常耗時(shí)，建議使用保護(hù)柱減少對(duì)色譜柱的污染，

Kromasil 保護(hù)柱 :

• 與Kromasil 色譜柱具有相同的填料，*佳保護(hù)色譜柱，同時(shí)不影響分析結(jié)果。

• 柱芯柱套式設(shè)計(jì)，成本低。

部分常規(guī)保護(hù)柱訂貨信息